安捷倫液相色譜儀的常見故障及解決方法

    安捷倫液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比

的差異，對混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。由于安捷倫液相色譜儀

HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集

等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)

分析等各種領(lǐng)域。但是由于人員素質(zhì) 樣品的性質(zhì)以及儀器本身等方面的原

因, 常常出現(xiàn)這樣那樣的分析故障嚴(yán)重影響了正常的生產(chǎn)分析。所以掌握一種

準(zhǔn)確、快速的排除儀器故障的方法非常重要。

安捷倫液相色譜儀的常見故障及解決方法：

1.柱壓高

  可能原因：（1）.緩沖液鹽分如（乙酸銨等）沉積于柱內(nèi)；

            （2）.樣品污染沉積；

    處理對于*種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓

逐漸下降后，相應(yīng)提高流速沖洗，柱壓大幅度下 降后，用常溫純水沖洗，之

后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18

柱，和純水反向沖洗柱子，換成甲醇沖洗，接著用甲 醇+異丙醇（4+6）沖洗

柱子，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分

鐘以上。

2.指示

  可能原因：（1）.泵密封墊圈磨損；

            （2）.大量氣泡進(jìn)入泵體。

    處理對于*種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同

時(shí)，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

3.不穩(wěn)定

  原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。

  處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸

入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，

放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

4.峰分叉

  可能原因：（1）、色譜柱被污染；

            （2）、柱頭填料塌陷；

    處理對于*種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著

用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子（沖洗時(shí)間的 長短由樣品污染的情況而

定），再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘

以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第 二種情況，擰開

柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分（污染的填料），裝入新填

料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹 鋼桿

壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干

凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

5.重復(fù)性差

  可能原因：（1）、進(jìn)樣閥漏液；

            （2）、加樣針不到位；

            （3）、液量不足；

    處理對于*種情況更換進(jìn)樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到

底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài) 轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證

進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，注意不要讓空氣進(jìn)

入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲液器內(nèi)的溶液如長時(shí)間未 用應(yīng)清洗儲液器并更換

溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機(jī)鹽析出或沉積；

樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，*溶解，盡量減

少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時(shí)避免注射過濃的樣品溶

液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分

析目的的色譜柱不要混用等。

 6.其他原因及處理方法